Umeå universitets logga

umu.sePublikationer
Ändra sökning
RefereraExporteraLänk till posten
Permanent länk

Direktlänk
Referera
Referensformat
  • apa
  • ieee
  • vancouver
  • Annat format
Fler format
Språk
  • de-DE
  • en-GB
  • en-US
  • fi-FI
  • nn-NO
  • nn-NB
  • sv-SE
  • Annat språk
Fler språk
Utmatningsformat
  • html
  • text
  • asciidoc
  • rtf
Plasmodium berghei high-throughput (PbHiT): a CRISPR-Cas9 system to study genes at scale
Umeå universitet, Medicinska fakulteten, Molekylär Infektionsmedicin, Sverige (MIMS). Umeå universitet, Medicinska fakulteten, Institutionen för molekylärbiologi (Medicinska fakulteten).
Umeå universitet, Medicinska fakulteten, Molekylär Infektionsmedicin, Sverige (MIMS). Umeå universitet, Medicinska fakulteten, Institutionen för molekylärbiologi (Medicinska fakulteten). Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular (IABIMO), INTA-CONICET, Buenos Aires, Hurlingham, Argentina.
Umeå universitet, Medicinska fakulteten, Umeå Centre for Microbial Research (UCMR). Umeå universitet, Medicinska fakulteten, Institutionen för molekylärbiologi (Medicinska fakulteten).ORCID-id: 0000-0002-7745-2844
Umeå universitet, Medicinska fakulteten, Molekylär Infektionsmedicin, Sverige (MIMS). Umeå universitet, Medicinska fakulteten, Umeå Centre for Microbial Research (UCMR). Umeå universitet, Medicinska fakulteten, Institutionen för molekylärbiologi (Medicinska fakulteten).ORCID-id: 0000-0003-2863-4112
2026 (Engelska)Ingår i: Bio-protocol, E-ISSN 2331-8325, Vol. 16, nr 2, artikel-id e5572Artikel i tidskrift (Refereegranskat) Published
Abstract [en]

Genetic modification is essential for understanding parasite biology, yet it remains challenging in Plasmodium. This is partially due to the parasite’s low genetic tractability and reliance on homologous recombination, since the parasites lack the canonical non-homologous end-joining pathway. Existing approaches, such as the PlasmoGEM project, enable genome-wide knockouts but remain limited in coverage and flexibility. Here, we present the Plasmodium berghei high-throughput (PbHiT) system, a scalable CRISPR-Cas9 protocol for efficient genome editing in rodent malaria parasites. The PbHiT method uses a single cloning step to generate vectors in which a guide RNA (gRNA) is physically linked to short (100 bp) homology arms, enabling precise integration at the target locus upon transfection. The gRNA also serves as a unique barcode, allowing pooled vector transfections and identification of mutants by downstream gRNA sequencing. The PbHiT system reliably recapitulates known mutant growth phenotypes and supports both knockout and tagging strategies. This protocol provides a reproducible and scalable tool for genome editing in P. berghei, enabling both targeted functional studies and high-throughput genetic screens. Additionally, we provide an online resource covering the entire P. berghei protein-coding genome and describe a step-by-step pooled ligation approach for large-scale vector production.

Ort, förlag, år, upplaga, sidor
2026. Vol. 16, nr 2, artikel-id e5572
Nyckelord [en]
Apicomplexan, CRISPR-Cas9, Gene modification, High-throughput, Malaria, Plasmodium, Plasmodium berghei, Transfection
Nationell ämneskategori
Cell- och molekylärbiologi
Identifikatorer
URN: urn:nbn:se:umu:diva-250569DOI: 10.21769/BioProtoc.5572ISI: 001676399900011PubMedID: 41607697Scopus ID: 2-s2.0-105030247594OAI: oai:DiVA.org:umu-250569DiVA, id: diva2:2045788
Forskningsfinansiär
Vetenskapsrådet, 2021-06602Knut och Alice Wallenbergs Stiftelse, 2019.0178CancerfondenTillgänglig från: 2026-03-13 Skapad: 2026-03-13 Senast uppdaterad: 2026-03-13Bibliografiskt granskad

Open Access i DiVA

fulltext(3221 kB)19 nedladdningar
Filinformation
Filnamn FULLTEXT01.pdfFilstorlek 3221 kBChecksumma SHA-512
e651e1ccd4bcee67e5344069e3e5934f10042f6e0c046fb16a70c054b6b15cba293fef604a426745bc1333da30faeaef11b6854a4252cc26bb8021a2fda652d7
Typ fulltextMimetyp application/pdf

Övriga länkar

Förlagets fulltextPubMedScopus

Person

Jonsdottir, Thorey K.Paoletta, MartinaHenriksson, JohanBushell, Ellen

Sök vidare i DiVA

Av författaren/redaktören
Jonsdottir, Thorey K.Paoletta, MartinaHenriksson, JohanBushell, Ellen
Av organisationen
Molekylär Infektionsmedicin, Sverige (MIMS)Institutionen för molekylärbiologi (Medicinska fakulteten)Umeå Centre for Microbial Research (UCMR)
I samma tidskrift
Bio-protocol
Cell- och molekylärbiologi

Sök vidare utanför DiVA

GoogleGoogle Scholar
Antalet nedladdningar är summan av nedladdningar för alla fulltexter. Det kan inkludera t.ex tidigare versioner som nu inte längre är tillgängliga.

doi
pubmed
urn-nbn

Altmetricpoäng

doi
pubmed
urn-nbn
Totalt: 965 träffar
RefereraExporteraLänk till posten
Permanent länk

Direktlänk
Referera
Referensformat
  • apa
  • ieee
  • vancouver
  • Annat format
Fler format
Språk
  • de-DE
  • en-GB
  • en-US
  • fi-FI
  • nn-NO
  • nn-NB
  • sv-SE
  • Annat språk
Fler språk
Utmatningsformat
  • html
  • text
  • asciidoc
  • rtf